膜蛋白过表达

好的开始是成功的一半 ‒ 膜蛋白表达策略的设计

表达构造体设计

跨膜蛋白的N-末端位于胞质侧还是细胞膜外侧决定了膜蛋白的拓扑和折叠，我们会首先评估膜蛋白在细胞膜上的拓扑学情况，对于N-末端位于细胞膜外侧的跨膜蛋白采用合适的信号肽。此外，膜蛋白的合成、折叠和成熟依赖核糖体和位于内质网的蛋白机器协同工作。蛋白质的核酸编码在决定膜蛋白的产量和命运方面起着重要作用。我们使用最先进的人工智能来设计膜蛋白的核酸序列，以确保膜蛋白的最佳产量、折叠和成熟。亲和标签也已被广泛用于提高膜蛋白的产量。沃臻生物的科学家在设计膜蛋白的最佳表达构造体方面拥有丰富的专业知识，为我们的客户解决药物发现中缺乏高质量的膜蛋白靶点的痛苦。

表达系统选择

我们具有丰富的蛋白质过表达系统，包括大肠杆菌、酵母、昆虫杆状病毒和哺乳动物细胞表达系统等，为客户提供高效的蛋白表达与纯化服务，以供蛋白结构与功能的研究。除此之外，我们根据客户的需求优化表达构造体，实现成本和收益的最大化，最大限度地节约客户成本。

四种蛋白表达系统比较
表达系统 优点 缺点
大肠杆菌表达系统 表达背景清楚，表达水平高，操作简单，培养周期短，抗污染能力强 不能进行翻译后的修饰加工，含有大量内毒素（见沃臻生物解决方案）
酵母表达系统 操作简单，表达量高，成本低，具有翻译后的修饰加工 蛋白水解酶有时造成严重困扰，N型糖基和O型糖基化与哺乳动物蛋白不同（见沃臻生物解决方案）
昆虫表达系统 高效表达，完善的加工修饰，易从无血清饰，上清中纯化蛋白，无内毒素 现有蛋白表达主要用昆虫杆病毒感染昆虫细胞实现，表达细胞最终全部死亡，无法进行连续性表达。N型糖基和O型糖基化与哺乳动物蛋白不完全相同。费用相对昂贵
哺乳动物表达系统 提供复杂的翻译后修饰，包括N型糖基化和O型糖基化，最接近天然蛋白 产率低，某些糖基化产物不稳定，费用昂贵

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