报告细胞系

报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,换言之,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。

一个理想的报告细胞系必须具备以下条件:

1.已被克隆和全序列已测定;

2.表达产物在受体细胞中不存在,即无背景,无内源性表达产物;

3.其表达产物能进行定量测定;

4.在基因的表达调控研究中,常用的报告基因有CAT(氯霉素乙酰转移酶基因)、SEAP(分泌型碱性磷酸酶)、荧光素酶等;

5.CAT基因作为报告基因,检测时可通过放射自显影观察;

荧光酶基因作为报告基因,具有检测速度快(不需使用放射自显影)、灵敏度比CAT基因高和费用低的特点。SEAP可以催化对硝基苯酚钠磷酸化,产生能被405nm波长检测到的黄光产物。

报告细胞系已经广泛应用于基因表达调控、信号转导通路及受体配体相互作用的研究中,是对细胞内信号转导跟踪的方法。

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