哺乳动物细胞瞬时转染表达和稳转细胞株表达系统

哺乳动物细胞表达的主要优点是用于真核蛋白质的合成、加工和分泌的信号被哺乳动物细胞正确有效地识别。因此，在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合，具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。

由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白质，在活性方面高于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统，更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物，特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中得到广泛应用；

哺乳动物细胞表达包括瞬时转染和稳转细胞株表达等。瞬时转染表达和稳转细胞株表达最显著的区别就是在时间上。瞬时转染在转染后四天即能收获细胞，瞬时转染一般用于基因产物的短期表达、蛋白质的小规模合成。目前，在进行哺乳动物细胞蛋白表达时，因为细胞培养技术的进步和人们对瞬时转染的不断探索，人们已经可以对一些常用细胞进行悬浮培养，实现了瞬时转染对重组蛋白的大规模合成，节省了时间和成本。相对于瞬时转染，稳转细胞株表达适用于长期的药理学研究遗传调控机制研究及大规模的蛋白质合成，需要大量的周期，因此更费力成本投入高；

哺乳动物细胞的转染方法

细胞转染，是指将外源基因导入细胞内的一种技术。目前，常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法）、生物介导（病毒介导转染、原生质体转染）。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。

下表是一些常用转染方法的原理，优缺点和适用性:

哺乳动物细胞的稳转细胞系构建

哺乳动物细胞稳转细胞系构建是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，使外源基因成为细胞基因组的一部分而得以复制。稳转细胞系构建是建立在瞬时转染的基础上的：先对哺乳动物细胞进行转染，再对得到的细胞池进行筛选最终得到稳转细胞系。在建立稳转转染细胞系时，我们需要使用选择标记来筛选出阳性克隆（外源基因已稳转整合至细胞的基因组上），同时剔除未稳转整合的细胞。最终通过流式分选或者有限稀释得到稳转转染的单克隆细胞株。稳转细胞株在重组蛋白/抗体生产、基因编辑、功能研究等方面起着重要的作用。

哺乳动物细胞的稳转细胞系的需求和解决方案

沃臻生物的哺乳动物瞬时表达服务

沃臻生物的科学家在哺乳动物细胞瞬时表达系统的分子生物学和细胞工程方面拥有丰富经验。我们专有的高密度（High Density, HD）哺乳动物细胞瞬时表达技术，以及优化的表达方案和培养基，确保蛋白和抗体产量达到g级水平。我们可提供灵活的服务以满足不同的定制需求，包括标签去除、内毒素去除、糖基化分析等。

沃臻生物的哺乳动物稳转细胞株表达服务

稳转细胞株适用于各种研究应用，如重组蛋白和抗体生产、基因编辑、功能性研究等等。沃臻生物多年从事膜蛋白和困难真核蛋白表达研究，具有大量稳定细胞株开发经验，能够有效提高稳定细胞株的生产能力，改善实验结果。我们整合所有的实验步骤，提供从基因序列到稳定株交付的一站式服务。